| 需时:4--6个月 | 免疫5只Balb/c 小鼠免疫 |
| 脾细胞和P2/0骨髓瘤细胞的融合 | |
| 利用ELISA技术检测筛选抗体杂交瘤 |
| 克隆化和扩大培养选择的杂交瘤 |
| 通过对选定单克隆抗体细胞株的细胞培养或产生的腹水进行单克隆抗体生产 |
| 对制备好的细胞上清或小鼠腹水进行纯化。 |
| 对纯化蛋白进行鉴定(流氏细胞仪、免疫组化、ELISA)和标记。 |
| 通过亚类、解离常数、Western Blot等方法鉴定。 |
| 标准单克隆抗体服务流程 | 通过规范化免疫接种程序免疫 5只 Balb/c小鼠。用ELISA测定血清效价。大约需要3-4mg 蛋白免疫原或2mg连接多肽免疫原和0.5mg未连接多肽。 |
| 当血清中抗体效价达到合适值后,利用小鼠脾细胞进行融合,以得到需要的杂交瘤并通过ELISA从生长中的杂交瘤细胞得到的上清液进行检测。如果需要克隆将会送交顾客实验室作鉴定。 |
| 根据客户需要,从多个阳性克隆中选择更可靠的克隆,通过有限稀释进行亚克隆和抗体类型的鉴定。从选择的克隆中来进行细胞培养或腹水制备。 |